Г.Ю. Ломакина, Е.Н. Истрате, Н.В. Руденко, Н.Н. Угарова
Синтез и применение конъюгатов люциферазы светляков с
антителами в биолюминесцентном иммуноанализе клеток Salmonella
Реферат
Разработан метод синтеза стабильных и высокоактивных
конъюгатов люциферазы светляков с антителами с использованием гетеробифункционального
сшивающего агента N-сукцинимидил 3-(2-пиридилдитио) пропионата (SPDP) в
качестве линкера NH2-групп антител со свободными SH-группами
термостабильной Luciola mingrelica люциферазы (Luc). Разработана новая
специфическая матрица для сорбции клеток Salmonella: монодисперсные
полистирольные микрочастицы (φ 240 нм) покрывали Плюроником F108-PDS, с
которым затем ковалентно связывали моноклональные антитела к клеткам Salmonella
(Sal). Конъюгаты Luc-Sal применяли как детектирующие агенты в
биолюминесцентном иммуноанализе клеток Salmonella. Использование новой
матрицы и высокоактивных конъюгатов Luc-Sal позволило повысить чувствительность
метода в ~100 раз по сравнению со стандартным "сэндвич"-методом.
Ключевые слова: люцифераза светляков, Luciola mingrelica,
моноклональное антитело, конъюгация, детекция клеток, Salmonella, биолюминесцентный иммуноферментный анализ,
Плюроник F10
Полный текст статьи в формате PDF
Вестник Московского Университета.
Химия 2014, том 55, № 2, стр. 71-78
Copyright (C) Химический факультет МГУ, 2014
|